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原核表达系统(大肠杆菌表达系统)

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原核表达系统(大肠杆菌表达系统)是基因表达技术中发展最早,应用最广泛的经典表达系统,近几十年,大肠杆菌表达系统也不断得到发展和完善,被科研及工业用户大量用于各种重组蛋白表达。与其它表达系统相比,具有目的基因表达水平高,培养周期短,抗污染能力强,成本相对低等特点。

美迪西科研人员建立了成熟的大肠杆菌表达及纯化服务平台,提供包括各种重组蛋白以及其复合物在大肠杆菌中的表达与纯化服务。

原核表达系统(大肠杆菌表达系统)服务项目:

  1. 重组质粒构建;
  2. 重组表达测试;
  3. 可溶性表达条件测试;
  4. 小规模蛋白表达和纯化(2L培养基培养产物);
  5. 大规模蛋白表达和纯化(10L以上)。 
步骤 实验内容 实验时间 备注
1 重组质粒构建 2 周 可选择不同载体,不同标签His, Trx , GST, SUMO…
2 重组表达测试 1周 不同表达菌株可选
3 可溶性表达测试 1-2周 不同诱导剂,诱导温度,也可重新考虑基于蛋白质
结构点突变或者缺失突变的突变体构建
4 小规模蛋白表达和纯化 1-2周 若为包涵体表达,时间和方法将有所调整
5 大规模蛋白表达和纯化 根据表达体积商定 可选择摇瓶或者发酵罐培养

备注:

  1. 您可根据实验需求选择上述任一实验内容,或相关实验内容的组合;
  2. 纯化时选用亲和纯化、离子柱纯化、疏水填料纯化和分子筛纯化; 蛋白本身特性,表达系统的选择会影响最终蛋白的纯度和活性;

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